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高效液相色谱分析,高效液相色谱分析中,固定相极性大于流动相极性

发布时间:2024-09-27 19:10:01 投资攻略

高效液相色谱分析:固定相极性大于流动相极性的奥秘

高效液相色谱分析(HLC)是一种基于高压液体为流动相的色谱过程,它区别于经典液相色谱,具有高压、高速、高效分离的特点。在高效液相色谱分析中,固定相极性大于流动相极性的方法被称为正相色谱法。

正相色谱法的基本原理

正相色谱法是一种利用固定相的极性大于流动相极性来分离混合物中各组分的色谱方法。在这种方法中,极性较大的组分更容易被固定相吸附,从而在色谱柱中停留时间较长,而极性较小的组分则容易在流动相中溶解,从而在色谱柱中停留时间较短。

正相色谱法的应用

正相色谱法在聚合物的分析中有着广泛的应用。例如,吸附色谱可以用来分离聚合物中的添加剂,如偶氮染料、抗氧化剂、表面活性剂等。正相色谱法也可用于石油烃类的组成分析。

正相色谱法中的极性关系

在正相色谱法中,有机相溶剂的极性越大,其洗脱能力越弱。在常见的反相液相色谱中,流动相的极性大于固定相的极性,溶质按照疏水性进行分离。

疏水坍塌现象

当反相填料色谱柱使用接近100%的水为流动相时,有时会发生分离能力突然丧失的现象,即被分析物质保留明显降低或完全不保留,这就是所谓的疏水坍塌。这种现象是由流动相不浸润固定相表面而致。

挽救疏水坍塌的方法

为了挽救疏水坍塌现象,可以通过使用含大量有机组分的流动相来浸润固定相,然后再用高水含量的流动相进行平衡。使用内嵌极性基团的反相色谱柱(如WatersSymmetryShieldR色谱柱)或非端基封口的色谱柱(如WatersResolve色谱柱)也可以有效避免疏水坍塌。

液-液色谱法

液-液色谱法是一种利用样品组分在两种不相溶的液相间的分配来进行分离的方法。其中一种液相为流动相,另一种液相是涂于载体上的固定相。当流动相极性小于固定相极性时,这种液-液色谱法也属于正相色谱法。

正相色谱法的局限性

虽然正相色谱法具有许多优点,但它也有局限性。例如,高效液相色谱分析不能分析沸点高、热稳定性差、相对分子量大于400的有机物。

液相色谱法的应用比例

在液相色谱法中,约70-80%的分析都使用正相色谱法。这表明正相色谱法在色谱分析中占据着重要的地位。

高效液相色谱分析中的正相色谱法是一种基于固定相极性大于流动相极性的分离方法。通过了解其基本原理和应用,我们可以更好地利用这种方法进行混合物中各组分的分离和分析。